Raleuse
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 | Sujet: copiéLa production d’un ARN synthétique commence avec un ADN  Mar 8 Mar - 13:09 | |
| La production d’un ARN synthétique commence avec un ADN Connaissant la structure primaire de l’antigène vaccinal, autrement dit la composition précise en acides aminés de la protéine contre laquelle on veut vacciner, on en déduit la séquence ADN qui lui correspond. C’est à partir de cet ADN que l’on produit l’ARN in vitro, en dehors de toute cellule. Les réactions biochimiques ont donc lieu dans un système acellulaire, ce qui facilite leur production et exclut tout risque de contamination par un éventuel agent infectieux intracellulaire (bactérie, virus). [Vous devez être inscrit et connecté pour voir cette image]L’ARN messager provient de la transcription in vitro d’un ADN circulaire (ADN plasmidique codant l’antigène vaccinal), préalablement linéarisé. Sahin U, Karikó K, Türeci Ö. Nat Rev Drug Discov. 2014 Oct;13(10):759-80.La formation de la molécule d’ARN résulte donc d’une réaction in vitro. Celle-ci a pour point de départ une molécule d’ADN circulaire, appelée ADN plasmidique, que l’on linéarise. Le brin d’ARN synthétique que l’on cherche à fabriquer sera la copie complémentaire de cet ADN plasmidique devenu linéaire. La réaction nécessite la présence d’une enzyme et de nucléotides (lettres de l’alphabet génétique, composants essentiels de toute molécule d’ARN). L’enzyme ARN polymérase copie alors l’ADN en utilisant les nucléotides. L’ARN messager synthétique produit est donc le résultat d’une transcription in vitro à partir d’un ADN circulaire. Une coiffe peut être ajoutée par voie enzymatique une fois la réaction terminée. Il est également possible qu’un analogue de coiffe synthétique soit synthétisé au cours même de la procédure. Enfin, une séquence terminale est ajoutée afin de construire un ARN messager complet. |
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